一九九六年五月，年仅十九岁的尾上举行了隆重的袭名公演，正式承袭了尾上菊之助这一承载着历史与传统的艺名。他凭借俊秀优雅的扮相，在舞台上塑造的歌舞伎女性角色以及风华绝代的美青年形象，深受广大观众喜爱与赞誉。进入两千年，尾上因成功诠释了《源氏物语》中气质高雅的紫上一角，声望急剧攀升，人气空前高涨。他与第七代市川新之助、第二代尾上辰之助一同被新闻界称为“平成三之助”，成为当时歌舞伎界备受瞩目的年轻力量。尾上与第十一代市川海老藏曾是同窗学友，两人私交甚笃，这份深厚的友谊也延续至艺术生涯中。二零零四年，当市川在巴黎举办其袭名纪念演出时，尾上亦专程前往助阵，以示支持。作为被寄予厚望、肩负歌舞伎未来发展的新一代翘楚，尾上菊之助始终孜孜不倦地精进传统艺能的深厚功底，同时亦以开放姿态积极投身于其他表演艺术领域。他曾受著名导演蜷川幸雄邀请，参演了融汇多部古希腊悲剧经典的大型舞台剧《希腊人》。在该剧中，他挑战饰演了背负弑母罪责的复杂角色俄瑞斯忒斯，而其姐姐寺岛忍则出演俄瑞斯忒斯的姐姐埃莱克特拉，姐弟同台，成就一段佳话。除此之外，他的舞台履历还涵盖音乐剧演出，并在纪念文森特·凡高诞辰一百五十周年的话剧中饰演青年时期的凡高，其涉猎角色类型之广泛，实在难以在此逐一列举。在影视表演方面，尾上早在九十年代就已初露头角，曾于《一寸法师》、《四十七人之刺客》等电影作品中亮相。公元两千年，他加入NHK大型历史连续剧《大河剧》《葵德川三代》的拍摄，饰演了丰臣秀赖这一历史人物。近年来，尾上在银幕上的表现愈发活跃且引人关注。继二零零六年出演由市川昆导演重新翻拍的《犬神家族》并担任重要角色后，零七年他首次担纲电影男主角，主演了夏季上映的恐怖题材大片《怪谈》。二零零九年十一月二十九日开始播出的NHK特别剧《坂上之云》中，他更挑战饰演了明治天皇这一重量级历史角色。二零二一年十月十八日，由尾上菊之助参与演出的《京鹿子娘二人道成寺》作为四部松竹歌舞伎作品之一，于北京人民艺术剧院的首都剧场进行了首轮放映。至二零二三年，他继续拓展演艺事业，参演了电视剧《侦探罗曼史》。
尾上菊之助出生于一个显赫的歌舞伎世家，他的父亲是著名的歌舞伎演员尾上菊五郎，母亲则是同样享有盛誉的女演员富司纯子。他的姐姐寺岛忍以及表哥俊藤光利也均在演艺界有着活跃的表现。2025年10月，这个艺术家族迎来了新的传承时刻，尾上菊之助的儿子，即七代目尾上丑之助，首次正式登上歌舞伎舞台。他的初演剧目是经典的《絵本牛若丸》。在这场具有重要意义的演出中，他的祖父、七世梅幸亲自饰演了剧中的常盤御前一角，而他的父亲尾上菊五郎则饰演了鬼三太，祖孙三代同台，共同完成了这次隆重的舞台亮相，成为梨园一段佳话。
第五代尾上菊之助出生于历史悠久的歌舞伎世家，自幼便浸润在浓厚的传统艺术氛围之中。他在年仅六岁时，便以尾上丑之助这一艺名，在剧目《绘本牛若丸》中完成了人生的首次登台表演，迈出了其艺术生涯的第一步。在日常训练中，菊之助尤为注重家学传承，他精心运用祖父七世梅幸先生所遗留的珍贵台本，来指导子女进行台词与表演的基础训练。同时，他亦通过家庭内部组织的“芝居”排练，尤其是其中高难度的“立廻り”武打动作练习，来系统性地培养下一代，确保歌舞伎技艺的核心精髓得以延续。至2025年，当其子迎来初舞台的重要时刻，菊之助与自己的父亲菊五郎、岳父吉右衛門联袂出演了经典之作《绘本牛若丸》，成功构筑起一个家族三代同台献艺的动人场景，生动展现了歌舞伎界代际协作与技艺传承的深厚格局。在后续隆重的袭名公演仪式上，菊之助特别强调了自己对于“弁天小僧”等一系列古典剧目角色的长久向往与深刻情感，并郑重表达了肩负起第六代艺名传承者的重大责任与坚定决心。他进一步提出，期望子孙后代能够通过近距离观察父辈们在舞台上的每一处细节与全身心的投入，从而切身感悟到古典艺术所蕴含的独特趣味与无穷深度，以此坚定不移地维护和发扬歌舞伎世家一脉相承的传承理念与艺术精神。
在一九九三年，由《一寸法师》所推出的作品中，汇聚了风吹淳、原田知世以及山崎努等多位知名演员的精彩演绎。紧随其后的一九九四年，《四十七人之刺客》这部作品则邀请了宫泽理惠、森繁久弥与高仓健等影坛巨匠共同参与，留下了深刻的印象。时光流转至二零零六年，《犬神家族》登上了舞台，其主演阵容包括了石坂浩二、松岛菜菜子与深田恭子等深受观众喜爱的艺人。次年，即二零零七年，《怪谈》与观众见面，这部作品由黑木瞳与井上真央联袂出演，其内容围绕着经典的怪谈题材展开。到了二零零八年，一部名为《暗号》的作品问世，它同时也拥有另一个名称，即《人体密码》，该片的主要演员有稻森泉和松冈俊介。进入二零一八年，《下町火箭2》这部作品亮相，其中塑造了“Gear Ghost”公司的社长伊丹大这一角色。最后在二零一九年，《Grand Maison 东京》呈现在大众面前，这部作品着重描绘了丹后学这一人物及其相关的故事脉络。
在其漫长的艺术生涯中，他曾屡获殊荣，其中包括于1985年与1987年两度荣获国力剧场特别奖，随后在1992年摘得歌舞伎座奖。1996年，他凭借出色的表现获得了浅草艺能大奖的新人奖肯定。此后，他的艺术成就继续得到广泛认可，于1999年及2000年连续两年获颁松竹会长奖。进入新世纪，他在2003年又赢得了松尾艺能新人奖的荣誉，并于2006年凭借其精湛的演出，成功获得了读卖演剧大奖中极具分量的杉村春子奖。这些奖项不仅记录了他艺术道路上的重要里程碑，也充分体现了业界对其杰出贡献的持续表彰。